Memahami tip pipet pengikat rendah

1. Apa tip pipet pengikat rendah?

Tip pipet pengikat rendah adalah bahan habis pakai laboratorium yang dirancang untuk pipettor (pipet) yang menampilkan perawatan permukaan khusus dan/atau terbuat dari bahan tertentu. Tujuan desain inti mereka adalah secara signifikan mengurangi adsorpsi sampel dan retensi di dinding bagian dalam ujung .

• Masalah Inti: Tip polypropylene stDanar memiliki permukaan dengan hidrofobisitas dan muatan yang melekat, yang dapat menyebabkan adsorpsi non-spesifik dari komponen sampel tertentu, terutama biomolekul (seperti protein, asam nukleat) dan larutan kental.
• Larutan: Tip pengikatan rendah mengubah sifat permukaan dinding bagian dalam melalui metode fisik atau kimia, membuatnya lebih hidrofilik dan lembam, sehingga mengurangi kekuatan interaksi antara molekul dan dinding ujung.

2. Bagaimana mereka bekerja (Teknologi Perawatan Permukaan)

Efek pengikatan rendah terutama dicapai melalui teknologi berikut:

• Aditif Polimer Khusus: Menggabungkan aditif polimer spesifik (mis., Pengubah hidrofilik) ke dalam bahan dasar polypropylene selama produksi, memberikan sifat ujung yang melekat pada sifat pengikatan rendah. Ini adalah metode arus utama saat ini dan paling stabil.
• Pelapis permukaan:
  • Lapisan hidrofilik: Menerapkan lapisan hidrofilik (mis., Pelapisan polimer tertentu) ke dinding bagian dalam untuk meningkatkan keterbasahan permukaan, mengurangi retensi cairan dan adsorpsi protein.
  • Pelapis Inert: Menerapkan pelapis yang sangat inert (mis., Turunan silan tertentu) untuk mengurangi situs aktif permukaan dan meminimalkan adsorpsi kimia.
• Perawatan Permukaan Khusus: Mengubah sifat mikrostruktur dan kimia dari permukaan polypropylene melalui metode fisik (mis., Perawatan plasma) atau etsa kimia untuk meningkatkan hidrofilisitas.
• Polypropylene Purity Ultra-High: Menggunakan bahan baku polypropylene dengan kDanungan pengotor yang sangat rendah untuk mengurangi situs adsorpsi potensial yang disebabkan oleh kotoran.

3. Keuntungan dan fitur utama

• Meminimalkan kehilangan sampel: Ini adalah keuntungan inti. Secara signifikan mengurangi adsorpsi dan retensi sampel yang berharga, konsentrasi rendah, atau menit (mis. Protein, DNA, RNA, enzim, antibodi, suspensi sel, reagen kental) pada dinding ujung, memastikan pemipaan pipet ketepatan and pemulihan .
• Meningkatkan presisi dan reproduktifitas eksperimental: Mengurangi adsorpsi berarti volume pengeluaran yang lebih konsisten, menurunkan kesalahan eksperimental yang disebabkan oleh pengambilan sampel, dan meningkatkan hasil keandalan and reproduktifitas .
• Mengurangi risiko kontaminasi silang: Pengusiran cairan yang lebih lengkap dan residu sampel yang lebih sedikit menurunkan risiko kontaminasi silang ketika secara berurutan menyalurkan sampel yang berbeda.
• Ideal untuk aplikasi sensitif: Meminimalkan dampak pada aktivitas sampel, membuatnya sangat cocok untuk eksperimen adsorpsi-sensitif dalam biologi molekuler, biologi sel, proteomik, diagnostik, dll.
• Meningkatkan keterbasahan: Biasanya menunjukkan hidrofilisitas yang lebih baik, memungkinkan cairan mengalir lebih lancar di dalam ujung, mengurangi kepatuhan meniskus dan pembentukan gelembung, yang mengarah ke operasi pemipaan yang lebih halus.

4. Aplikasi utama (percobaan mana yang sangat membutuhkannya?)

Kiat pengikatan rendah sangat dianjurkan, hampir penting, untuk aplikasi berikut:

• Biologi Molekuler:
  • PCR throughput tinggi, qPCR, DDPCR: Mengurangi kehilangan DNA/template, memastikan efisiensi amplifikasi dan akurasi kuantifikasi.
  • Persiapan Pemurnian & Perpustakaan Asam Nukleat: Mencegah hilangnya fragmen DNA/RNA yang berharga selama pemurnian.
  • Persiapan sampel NGS: Pipeting yang tepat dari perpustakaan menit sangat penting.
• Penelitian Protein:
  • Uji konsentrasi protein (BCA, Bradford, dll.): Mencegah adsorpsi protein yang mengarah pada perkiraan konsentrasi yang terlalu rendah.
  • Tes Aktivitas Enzim/Kinetika: Memastikan kuantitas enzim yang akurat dan menghindari kehilangan aktivitas.
  • Persiapan sampel Western blot: Pipeting protein yang tepat dalam buffer yang mengandung SDS atau agen pereduksi.
  • Pemurnian protein (mis., Koleksi fraksi kromatografi afinitas): Menghindari hilangnya protein target.
• Kultur sel & eksperimen terkait:
  • Melewati/pelapisan garis sel yang berharga atau sel primer: Mengurangi kehilangan adhesi sel di dalam ujung.
  • Tes viabilitas sel: Pipeting akurat suspensi dan reagen sel.
  • Transfeksi: Pipeting DNA, RNA, kompleks reagen transfeksi.
• Diagnostik & Pengujian Klinis: ELISA, Immunoassays Chemiluminescent, POCT: Memastikan sampel yang tepat dan volume reagen, meningkatkan sensitivitas dan akurasi deteksi.
• Solusi kental atau rawan busa: Gliserol, DMSO, solusi surfaktan, buffer tertentu: mengurangi retensi dan carryover, meningkatkan akurasi pipetting.
• Eksperimen apa pun yang melibatkan sampel yang berharga, kecil, atau membutuhkan presisi dan reproduktifitas yang tinggi.

5. Bagaimana memilih ujung pipet pengikat rendah yang tepat?

• Kesesuaian: Persyaratan utama adalah mereka harus Bersikaplah sangat kompatibel dengan merek dan model pipet Anda. Selalu verifikasi daftar kompatibilitas atau berkonsultasi dengan panduan pabrikan sebelum membeli.
• Sertifikasi & Kualitas:
  • Bersertifikat RNase/DNase/Pyrogen-Free: Penting untuk biologi molekuler dan percobaan kultur sel. Pastikan sertifikasi yang andal.
  • PCR Certified PCR Free: Sangat penting untuk aplikasi PCR/QPCR.
  • Kualitas manufaktur: Manufaktur berkualitas tinggi memastikan dimensi yang tepat, bentuk yang konsisten, tidak adanya gerinda, dan kurangnya kontaminasi partikulat (tingkat kebersihan). Pilih merek terkemuka.
• Level Kinerja Binding Rendah: Kinerja dapat bervariasi antara merek dan seri. Perhatikan data kinerja yang disediakan pabrikan (mis., Laporan uji residu adsorpsi protein). Untuk aplikasi yang sangat menuntut (mis., Sekuensing sel tunggal, deteksi protein kelimpahan ultra-rendah), ujung pengikat rendah tingkat atas mungkin diperlukan.
• Kemasan & Sterilitas:
  • Format Pengemasan: Racked (ditumpuk atau curah), kantong, disaring (opsional). Pilih kemasan yang sesuai dengan alur kerja dan kebutuhan otomatisasi Anda.
  • Tips yang difilter: Jika mencegah kontaminasi aerosol dari poros pipet diperlukan, pilih tip pengikat rendah dengan filter (ujung filter pengikat rendah). Filter itu sendiri juga harus mengikat rendah.
  • Pra-disterilkan: Sebagian besar percobaan memerlukan tips pra-disterilkan (biasanya gamma diiradiasi). Verifikasi metode sterilisasi dan tingkat jaminan sterilitas (SAL). Kiat non-steril cocok untuk beberapa aplikasi non-kritis atau jika lab melakukan sterilisasi sendiri.
• Efektivitas Biaya: Kiat pengikat rendah umumnya lebih mahal daripada tips standar. Mengevaluasi efektivitas biaya saat memenuhi persyaratan kinerja. Jangan berkompromi pada percobaan kritis dengan menggunakan tips standar untuk menghemat biaya, karena data yang tidak akurat atau kehilangan sampel dapat menyebabkan limbah yang lebih besar.

6. Catatan Penggunaan

• Lampiran yang tepat: Pastikan ujungnya terpasang dengan aman dan pas melekat pada pipet tanpa celah untuk mencegah kebocoran udara dan volume yang tidak akurat.
• Pra-pembasahan: Untuk cairan kental atau volatil, pra-pembasahan (aspirasi dan pengeluaran cairan beberapa kali sebelum transfer yang sebenarnya) kadang-kadang dapat meningkatkan akurasi lebih lanjut (bahkan dengan ujung pengikatan rendah). Ikuti Pedoman Operasi Pipet.
• Hindari ujung ujung yang menyentuh: Menjaga sterilitas dan mencegah kontaminasi.
• Penyimpanan: Simpan di tempat yang sejuk dan kering jauh dari sinar matahari langsung dan debu. Perhatikan tanggal kedaluwarsa pada kemasannya.